Руководящие принципы ВОЗ по лабораторной биобезопасности при работе с образцами, в которых подозревается наличие вируса птичьего гриппа А

12 января 2005 г.

Общие рекомендации

Вероятность инфицирования людей вирусами птичьего гриппа А в результате инцидента в лаборатории представляет собой риск, в отношении которого необходимо постоянно сохранять бдительность. Усилия по минимизации передачи инфекции среди людей могут оказаться напрасными из-за пробелов в лабораторной биобезопасности.

Ответственность за разработку всесторонней политики в области безопасности, включая руководство по технике безопасности и вспомогательные программы для ее соблюдения, обычно лежит на директоре или руководителе института или лаборатории. Однако остальные руководители и сотрудники лаборатории также несут ответственность за лабораторную безопасность, при этом отдельные работники отвечают как за свою собственную безопасность, так и за безопасность своих коллег.

В основе лабораторной безопасности лежат надлежащие микробиологические методики. Использование безопасного оборудования при проведении надлежащих операций и применении надлежащей практики способствует снижению риска при работе с веществами, представляющими биологическую опасность. Ниже изложены наиболее важные положения.

• Необходимо всегда соблюдать стандартные меры предосторожности (на английском языке); при взятии образцов у пациентов следует всегда использовать барьерные средства защиты (халаты, перчатки). Помимо этих стандартных мер предосторожности необходимо защищать глаза.
  
  
• Соблюдение практических и методических рекомендаций для базовых лабораторий второго уровня биобезопасности (УББ2) (см. Практическое руководство ВОЗ по биологической безопасности в лабораторных условиях) должно быть минимальным требованием при работе с образцами.
  
  
• В число установленных лабораторных операций, для выполнения которых требуется УББ2, входят:
  
  
• обычное биологическое тестирование образцов сыворотки и крови (в том числе гематология и клиническая биохимия);
  
  
• манипуляции с нейтрализованными или инактивированными (лизированными, фиксированными или обработанными каким-либо другим способом) частицами вируса и/или неполными, неинфекционными сегментами вирусного генома;
  
  
• окончательная упаковка образцов для транспортировки в диагностические лаборатории для дополнительного тестирования; образцы должны быть уже помещены в герметически закрытые, деконтаминированные первичные контейнеры.
  
  
• Необходимо соблюдать надлежащую практику проведения лабораторных испытаний. В рабочих зонах лаборатории запрещается есть, пить, курить, пользоваться косметикой и производить манипуляции с контактными линзами.
  
  
• При работе с образцами, их обработке и проведении диагностического тестирования в лабораториях необходимо использовать индивидуальные защитные средства (халат, перчатки, защитные средства для глаз).
  
  
• Все технические операции необходимо проводить таким образом, чтобы свести к минимуму образование аэрозолей и капель.
  
  
• Все манипуляции, которые могут приводить к разбрызгиванию, образованию капель или аэрозолей инфекционных материалов (например, центрифугирование, перемалывание, смешивание, интенсивное встряхивание или перемешивание, дробление ультразвуком, открытие контейнеров с инфекционными материалами, внутреннее давление в которых может отличаться от атмосферного), необходимо производить в боксах биологической безопасности или при использовании других устройств для физической изоляции.
  
  
• Необходимо ограничивать использование игл и шприцев для подкожных инъекций. Их нельзя использовать в качестве заменителей пипетирующих устройств или в каких-либо иных целях, отличных от парентеральных инъекций или аспирации жидкости у лабораторных животных. Пипетирование ртом должно быть строго запрещено.
  
  
• Для утилизации зараженных отходов необходимо иметь в наличии надлежащие и удобно расположенные контейнеры для веществ, представляющих биологическую опасность.
  
  
• Рабочие поверхности должны быть продезинфицированы после любого разлития потенциально опасных веществ и в конце рабочего дня. Как правило, для обработки разлитий биологически опасных веществ подходят только что приготовленные растворы хлора. Дополнительная информация о дезинфекции и стерилизации приводится в Практическом руководстве ВОЗ по биологической безопасности в лабораторных условиях.
  
  
• Сотрудники лабораторий должны часто мыть руки - особенно, после работы с инфекционными веществами и животными, перед выходом из рабочих зон лабораторий и перед едой.
  
  
• Сотрудники лабораторий должны снимать средства индивидуальной защиты перед выходом из лабораторий.

Руководящие принципы ВОЗ по биобезопасности при работе с образцами, которые могут содержать вирус птичьего гриппа А

Лаборатории должны соблюдать основные нормы УББ2 и применять практические методики УББ3 для того, чтобы безопасно:

• получать необходимое количество образцов и/или растворять образцы
• проводить диагностическое тестирование, при котором не происходит репродукция вирусных агентов в пробирке или живом организме
• производить экстрагирование нуклеиновых кислот при использовании необработанных образцов
• подготавливать мазки, используя нагрев или химическую фиксацию.

В следующих областях необходимо соблюдать нормы УББ3:

• Любую операцию, во время которой могут образовываться аэрозоли и капли, необходимо производить в боксе биологической безопасности (например, дробление ультразвуком, интенсивное перемешивание).
  
  
• Сотрудники лабораторий должны использовать средства индивидуальной защиты, в том числе одноразовые перчатки, халаты, закрытые или завязывающиеся сзади, хирургические костюмы или комбинезоны, полностью закрывающие предплечья, головные уборы и, при необходимости, бахилы или специально предназначенную обувь, средства для защиты глаз и хирургические маски или лицевые щитки в связи с риском контакта с аэрозолями или каплями при выполнении конкретных манипуляций.
  
  
• При центрифугировании образцов их необходимо помещать в герметически закрываемые роторы или стаканы. Эти роторы или стаканы следует опорожнять в боксе биологической защиты.
  
  
• После обработки образцов рабочие поверхности и оборудование должны быть продезинфицированы. Можно использовать стандартные вещества для дезинфекции, эффективные для вирусов без внешних оболочек, при надлежащем выполнении рекомендаций производителя. Как правило, только что приготовленные растворы хлора¹ годятся для использования в случае разлития биологически опасных веществ. Дополнительная информация о дезинфекции и стерилизации приводится в Практическом руководстве ВОЗ по биологической безопасности в лабораторных условиях.
  
  
• Биологические отходы, загрязненные образцами с подозреваемой или подтвержденной инфекцией A/H5, необходимо обрабатывать в соответствии с указаниями, изложенными в Практическом руководстве ВОЗ по биологической безопасности в лабораторных условиях.
  
  

В случае если какая-либо процедура или операция не может быть выполнена в боксе биологической безопасности, необходимо применять надлежащее сочетание индивидуальных защитных средств (например, респираторы, лицевые щитки) и устройств для физической изоляции (например, "стаканы безопасности" или герметически закрываемые роторы центрифуги).

ВОЗ убедительно рекомендует принять и применять описанные выше меры предосторожности УББ3 для работы с образцами, содержащими вирус A/H5, в лабораториях УББ2.

Если условия лабораторий не соответствуют, как минимум, условиям базовых лабораторий УББ2, образцы необходимо направлять в оборудованные надлежащим образом справочные лаборатории (на английском языке) для проведения первичных диагностических тестов.

В лабораториях, отвечающих нормам изолированной лаборатории УББ 3, работники которых имеют квалификацию для выполнения соответствующих операций УББ 3, могут проводиться следующие процедуры:

• диагностические тесты, во время которых происходит репродукция вирусных агентов в пробирке или живом организме
• операции, при которых происходит репродукция вируса гриппа A/H5 в клеточных культурах, и/или хранение изолятов клеточных культур
• извлечение вирусных агентов из культур образцов, содержащих вирус гриппа A/H5
• манипуляции, при которых происходит рост и скапливание вирусов гриппа A/H5.

¹Рабочие поверхности необходимо дезинфицировать после любых разлитий потенциально опасных веществ и в конце рабочего дня. Обычное дезинфицирующее средство, используемое в лабораториях для всех целей, должно иметь концентрацию активного хлора 1 г/л (0,1 %). Для обработки разлитий веществ, представляющих биологическую опасность, и при наличии больших количеств органических веществ рекомендуется использовать более сильный раствор с концентрацией активного хлора 5 г/л (0,5 %). Растворы гипохлорита натрия, домашнего отбеливателя, содержат 50 г активного хлора на 1 л, поэтому их необходимо разводить в соотношении 1:50 или 1:10 для получения необходимой концентрации 1 г/л или 5 г/л, соответственно. Разбавленные растворы хлора необходимо готовить непосредственно перед их применением и оставлять на зараженной поверхности, как минимум, на 10 минут. Хлор является коррозийным веществом и не может быть использован для всех поверхностей. Альтернативные варианты соединений, которые могут быть использованы для дезинфекции и стерилизации, приводятся в Практическом руководстве ВОЗ по биологической безопасности в лабораторных условиях.